| 基于化学修饰的纳米孔对整合素构象检测的方法 | |
梁丽媛; 张明焜 ; 王德强; 吕守芹; 吴吉; 谢婉谊; 李宁; 潘君; 李荣洁; 尹雅洁; 翁婷; 殷博华
| |
| 2024-03-22 | |
| Rights Holder | 中国科学院重庆绿色智能技术研究院 ; 中国科学院力学研究所 |
| Abstract | 本发明公开了基于化学修饰的纳米孔对整合素构象检测的方法，通过共价修饰构建功能化的纳米孔电学检测通道，配置不同浓度不同离子种类条件的整合素缓冲液样品，在外加偏压条件下检测具有不同构象的整合素穿过纳米孔的电学信息，对电学信息进行分析以实现定量与构象区分检测。本方法制样简单、操作便捷、响应灵敏，通过不同条件的电学信息对比，能够更清晰的呈现整合素的单分子构象信息；还能提供整合素的体积、表面电荷属性、浓度等信息；同时也可以进行单分子穿孔速率调控和特异性检测。 |
| Application Date | 2021-12-16 |
| Application Number | CN202111543733.6 |
| Patent Number | CN114199971B |
| Claim | 1.一种基于化学修饰的纳米孔对整合素构象检测的方法，其特征在于：所述方法采用化学修饰的纳米孔，在外加偏压的条件下测试待测样本通过纳米孔的电学信息，通过电学信息对待测样本中的整合素进行定性和/或定量分析； 所述待测样本包括二价金属离子缓冲液，以及整合素与二价金属离子缓冲液组合而成的复合溶液； 所述化学修饰具体为：氮气保护氛围中，将亲水活化处理并干燥的硅基氮化硅薄膜与氯硅烷试剂在无水四氢呋喃中反应，经过溶剂清洗去除过量氯硅烷试剂后再与末端功能化的聚乙二醇在干燥条件下震荡反应2h，数次微热清洗去除物理吸附的聚合物，完成对纳米孔的化学修饰； 所述二价金属离子缓冲液包括1 M KCl、1×PBS、 pH 7.4缓冲液，和/或1 M KCl、1×PBS、5 mM MgCl2、 pH 7.4缓冲液，和/或1 M KCl、1×PBS、1 mM MnCl2、 pH 7.4缓冲液；将溶于1×PBS缓冲液中冷冻保存的100 ug/mL 的整合素母液放置室温，用所述二价金属离子缓冲液稀释，获得浓度为1-10 ug/mL的所述复合溶液； 所述电学信息的处理方式具体为：将所述电学信息转换为文本数据并统计作图，对比不同金属离子条件下整合素穿过纳米孔时的信号频率和数据特征； 所述信号频率和数据特征包括过孔方向、穿孔捕获率、易位时间、阻塞幅值和阻孔率；对所述过孔方向、穿孔捕获率、易位时间、阻塞幅值和阻孔率进行对比分析，对不同金属离子诱导的整合素构象特征进行鉴别。 |
| Language | 中文 |
| Classification | 发明授权 |
| Status | 有效 |
| Note | 授权 |
| Country | 中国 |
| Agency | 北京元本知识产权代理事务所(普通合伙) |
| Document Type | 专利 |
| Identifier | http://dspace.imech.ac.cn/handle/311007/97425 |
| Collection | 微重力重点实验室 |
| Recommended Citation GB/T 7714 | 梁丽媛,张明焜,王德强,等. 基于化学修饰的纳米孔对整合素构象检测的方法. CN114199971B[P]. 2024-03-22. |
| Files in This Item: | Download All | |||||
| File Name/Size | DocType | Version | Access | License | ||
| Pt2024F118.pdf（969KB） | 专利 | 开放获取 | CC BY-NC-SA | View Download | ||
Items in the repository are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.
Edit Comment